ผลของค่า pH และอุณหภูมิของไพร์โรลิโดนต่อสารละลายน้ำ PVP มีบทบาทในการเก็บรักษาเมล็ดของเซลล์ การทำงานที่เหมาะสมและสภาวะการแช่แข็งที่เหมาะสมสามารถลดการเปลี่ยนแปลงหรือการสูญเสียคุณลักษณะของเซลล์ได้ สารละลาย PVP ที่ไม่เชื่อมโยงข้ามไม่มี thixotropy พิเศษ เว้นแต่จะเป็น thixotropic ที่ความเข้มข้นสูงและแสดงเวลาผ่อนคลายที่สั้นมาก ประสบการณ์ด้านการแช่แข็งเซลล์: การเลือกเครื่องมือแช่แข็งที่เหมาะสมเป็นวิธีที่ดีที่สุด การแช่แข็งเซลล์เป็นเทคโนโลยีที่เก็บเซลล์ไว้ในสภาพแวดล้อมที่มีอุณหภูมิต่ำ ลดการเผาผลาญของเซลล์ และบรรลุการเก็บรักษาในระยะยาว (ไพโรลิโดน) ในเซลล์ส่วนใหญ่ ประสิทธิภาพการทำให้หนาขึ้นของ PVP มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับมวลโมเลกุลสัมพัทธ์ ภายใต้สภาวะความเข้มข้นที่กำหนด ยิ่งมวลโมเลกุลสัมพัทธ์มากเท่าใด ความหนืดก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น เซลล์จะยังคงสะสมและเปลี่ยนแปลงไปตามอายุและวิวัฒนาการ ทำให้เกิด "การเบี่ยงเบนทางวัฒนธรรม" ของฟีโนไทป์และจีโนไทป์ การแช่แข็งที่ถูกต้องและประสบความสำเร็จมีบทบาทสำคัญในการใช้เซลล์ในระยะยาว
ดังนั้นในระหว่างกระบวนการแช่แข็ง ดังนั้น การเพาะเลี้ยงที่ถูกต้องและการรวบรวมเซลล์อย่างอ่อนโยน ก่อนที่จะแช่แข็ง เซลล์ควรรักษาสถานะการเจริญเติบโตที่ดีที่สุด (ในระยะลอการิทึมหรือเอ็กซ์โพเนนเชียล) ตามหลักการแล้ว ควรเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อ 24 ชั่วโมงก่อนเก็บเกี่ยว แนะนำให้ตรวจสอบการเพาะเลี้ยงเพื่อหาสารปนเปื้อนของจุลินทรีย์ โดยเฉพาะไมโคพลาสมา เพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์ไม่มีการปนเปื้อน ในระหว่างกระบวนการรวบรวมเซลล์ การดำเนินการทดลองควรเป็นไปอย่างนุ่มนวลที่สุดเพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายของเซลล์ (ไพโรลิโดน) สารป้องกันความเย็นที่เหมาะสม ปัจจุบันเทคโนโลยีสำหรับการแช่แข็งเซลล์ที่นิยมใช้กันทั่วไปคือการเก็บรักษาด้วยไนโตรเจนเหลว ซึ่งส่วนใหญ่ใช้วิธีการแช่แข็งแบบช้าๆ โดยมีสารป้องกันในปริมาณที่เหมาะสมในการแช่แข็งเซลล์และลดความเสียหายต่อเซลล์ในระหว่างกระบวนการแช่แข็ง หากเซลล์ถูกแช่แข็งโดยตรงโดยไม่มีสารป้องกัน น้ำภายในและภายนอกเซลล์จะก่อตัวเป็นผลึกน้ำแข็งอย่างรวดเร็ว ทำให้เกิดอาการไม่พึงประสงค์ตามมา
โพลีไวนิล ไพโรลิโดน, เอทิลีนไกลคอล, เมทานอล และเมทิลอะเซทาไมด์ ล้วนแต่เป็นสารป้องกันความเย็นจัด ไดเมทิลซัลฟอกไซด์ (DMSO) และกลีเซอรอลเป็นเรื่องธรรมดาในการเก็บรักษาเซลล์ด้วยการแช่แข็ง สารทั้งสองนี้มีน้ำหนักโมเลกุลน้อย ละลายได้สูง และสามารถทะลุเซลล์ได้ง่าย พวกเขาสามารถลดจุดเยือกแข็งและเพิ่มการซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์ลงน้ำได้ สิ่งสำคัญอยู่ที่ธรรมชาติของเซลล์ (ไพร์โรลิโดน) DMSO โดยปกติจะมีความเข้มข้น 5-10% (ปริมาตร/ปริมาตร) และความเข้มข้นที่เหมาะสมที่สุดจะแตกต่างกันไปตามเส้นเซลล์ที่ต่างกัน ความเข้มข้นสุดท้ายของกลีเซอรอลในตัวกลางเยือกแข็งคือ 5-15% ในทำนองเดียวกัน ความเข้มข้นที่เหมาะสมที่สุดจะขึ้นอยู่กับเส้นของเซลล์ เพื่อเพิ่มอัตราการรอดของเซลล์ที่เก็บรักษาได้ยาก คุณสามารถเลือกเพิ่มความเข้มข้นของซีรั่มในสารละลายสำหรับเก็บรักษาระหว่างการเก็บรักษาด้วยความเย็นจัดได้ หากคุณต้องการแช่แข็งเซลล์อย่างรวดเร็วและมั่นคงยิ่งขึ้น โซลูชันการแช่แข็งเซลล์จะเป็นตัวเลือกที่ดี ไม่จำเป็นต้องมีการเตรียมตัว เพียงเติมสารละลายแช่แข็งในปริมาณที่เหมาะสมลงในเซลล์ การดำเนินการนั้นง่ายและคุณสามารถมีเซลล์ที่มีความมีชีวิตสูงได้
